高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动互为,使用高压输液系统,将具备有所不同极性的单一溶剂或有所不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动互为泵入装有相同相的色谱柱,在柱内各成分被分离出来后,转入检测器展开检测,从而构建对试样的分析。该方法已沦为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中最重要的分离出来分析技术。
作为实验室最少见的精密仪器之一,其用于频率较高,更容易经常出现各种故障,因此,小编整理了HPLC用于过程中少见的日常确保和维修方法,期望给用户的日常用于获取一定的参照。一、流动相及样品的制取拒绝1.高效液相级色谱醇,二次蒸馏水,缓冲器盐一定要过滤器,且流动互为必须定期替换。2.流动互为脱气至关重要(可使用抽滤,超声波脱气等方法);3.样品沉淀后,用0.22微米的有机系膜或者水系膜过滤。二、高压恒流泵的确保和维修1.高压恒流泵为整个色谱系统获取平稳平衡的流动互为流速,保证系统的平稳运营和系统的再现性。
高压输液泵由Q电机和柱塞等构成,低压力长时间的运营返渐渐磨损泵的内部结构。在增高流速的时候不应梯度增高,最差每次增高0.2mL/min,当压力平稳时再行增高,如此重复直到增高到所须要流速。2.类似情况下可拆下来滤头提取以辨别其中否阻塞;均可用注射器汲取流动互为通过吸食滤头投出以辨别其否阻塞。
若有阻塞情况能用异丙醇或甲醇超声波清除;清除不顺利则必须替换。3.在仪器用于完了以后,要及时清除管路并冲洗泵,确保泵的较好运转环境,确保泵的长时间使用寿命。三、色谱柱的确保和维修1.所用于的流动相均有误HPLC级或相等于该级别的,在配备过程中所有非HPLC级的试剂或溶液皆经0.22um薄膜过滤器,而且流动互为用于前都经过超声仪成像脱气后才用于。
2.所用于的水必需是经过提纯提纯后再行经过0.22um水膜过滤后用于,所有试液皆定名现配。并且在进样的样品都必需经过0.22um薄膜针筒过滤器后进样。
3.所用于到的仅次于流速为1.0mL/min,所以流速提高过程不应是梯度提高,不不存在流速的突升突降。4.仪器检测完了,必须用流动互为梯度洗刷色谱柱1小时以上。
四、工作站的确保经常出现死机可重新启动计算机;不长时间运营时,首先可替换电脑测试其硬件故障;或在本机上新的插拔模块、重新安装软件。
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